Akademik Veri Yönetim Sistemi
Yeşilkaya A. (Yürütücü), Tokay A.
Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, 2006 - 2007
Angiotensin II’nin (Ang II) hem
apoptotik hem de anti-apoptotik sinyal mekanizmaları üzerinde etkili olduğu yapılan
çalışmalar ile görülmektedir. Vasküler düz kas hücrelerinde (VDKH)
anti-apoptotik etkilerini Akt/protein kinaz B (PKB) üzerinden gösterdiği de
bilinmektedir. Bununla birlikte, aktive olmuş fosforile Akt’nin hücre içinde
aktivasyonunu sağladığı birçok alt sinyalizasyon yolları arasında IKK (NF-kB – hücre yaşamsallığı), p70S6K
(protein sentezi) gibi yolların yanı sıra, mitokondriyal proteinlerden Bad, Bcl–2
gibi aktivatörler üzerinden apoptozisi tetiklediği de gösterilmiştir.
Literatürdeki çalışmalarda
gözlemlediğimiz bu ikilem ve çelişki; Akt’nin hem hücre yaşamsallığında hem de
apoptoziste rolünün olması, bu molekülün onkojenik şartlarda da hücreyi
apoptozise götürebilmekte bir hedef molekül olabileceğini göstermektedir.
Çalışmamızda, VDKH’lerinde, Akt’nin
özellikle apoptozis için bir kavşak proteini olduğunu gösterebilmek amacıyla, primer
VDKH kültüründe Ang II uyarımına bağlı olarak Akt fosforilasyon düzeylerini,
aynı hücre kültüründe interferon-g ile apoptotik
şartlarda da gözlemlenmesi düşünülmektedir. Bununla birlikte, Ras-plazmidi
yardımıyla onkojenik VDKH’lerinde interferon-g
ile apoptotik sinyalizasyon yollarının aktive olduğu durumlarda Akt
fosforilasyon düzeyleri kıyaslanacaktır. Onkojenik ve normal hücrelerde olası
Akt fosforilasyonunun etkilediği aşağı efektör molekülleri ile etkileşimini gözlemleyebilmek
amacıyla Bad ve Bcl–2 immünpresipitasyonları ve kaspas III ölçümleri ile apoptotik
sinyallerin hücre içerisinde tetiklendiği ispat edilecektir.
Bu doğrultuda, çalışmamızın
getirdiği bilimsel katkı olarak; onkojenik VDKH’leri apoptozise götürülürken,
anahtar molekül olarak belirlediğimiz Akt’nin rolünün belli olması, ileri
kanser çalışmalarına da moleküler düzeyde ışık tutacağı kanısındayız.